1.保留值與分離度重現(xiàn)性不好原因分析

問(wèn)題                                  原因                                   表現(xiàn)
 
不同色譜柱間差異         填料效率和安、鍵合相不同           保留因子（k）勃勃生機，分離因子（α）

使用期間柱變化             柱床破壞                            柱效（N）

                    鍵合相丟失                        保留因子（k），分離子（α）

                    硅膠基質(zhì)溶解                    柱效（N）

                    強(qiáng)保留分堆積堵塞            保留因子（k）極致用戶體驗，柱效（N）
 
柱外效應(yīng)                         系統(tǒng)差異廣度和深度，進(jìn)樣量大深入交流、   柱效（N）

                    進(jìn)樣閥與   色譜柱之間、

                    色譜柱與檢測(cè)器之間管

                    路太長(zhǎng)加強宣傳、檢測(cè)器流通池

                    體積大臺上與臺下、接頭死體積大

                    等。
 
分離效果變差                 流動(dòng)相組分改變               保留因子（k）技術發展，柱效變化很小 

                    流速改變                           保留因子（k）集聚效應，分離因子（α）

                    溫度改變                           保留因子（k），柱效變化很小
 
柱平衡慢                        重新平衡時(shí)間不夠            保留因子（k）重要手段，柱效變化很小
 
柱超載                            樣品量太大                        保留因子（k）互動講，柱效（N）
 

2.造成色譜峰（不對(duì)稱）拖尾的原因

1.色譜柱本身填裝問(wèn)題，篩板堵塞或填料塌陷像一棵樹；

2.柱頭有污染過程中；

3樣品超載；

4樣品溶劑不合適能運用；

5.柱外效應(yīng)達到；

6化學(xué)或二次保留（硅羥基）效應(yīng)；

7緩沖容量不足或不合適不可缺少；

8重金屬污染蓬勃發展。

3.如何解決峰形拖尾的問(wèn)題

A．與化學(xué)有關(guān)的拖尾問(wèn)題

1．流動(dòng)相中，加入30mM的三乙胺（用與堿性化合物）或醋酸胺（用與酸性化合物）積極回應，未

知化合物加醋酸三乙胺重要性；

2．如仍然拖尾，將三乙胺換為二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）多種場景；

3．降低進(jìn)樣量至<1ug多元化服務體系。

 
B．與色譜柱有關(guān)的拖尾問(wèn)題

1．如柱頭處有強(qiáng)保留的樣品組分積聚，反相柱可用20倍柱體積的96%的二碌甲烷與4%甲

醇擴大公共數據，加1%氫氧化銨混合液沖洗大幅拓展，正向柱可用甲醇沖洗。

2．使用保護(hù)柱

C．與HPLC 系統(tǒng)有關(guān)的峰拖尾和峰加寬

1．進(jìn)樣體積過(guò)大更加堅強，（通撑c時俱進！?5uL）；

2．進(jìn)樣閥與色譜柱及檢測(cè)器之間的管路體積過(guò)大（*佳連接管應(yīng)<20cm更適合，內(nèi)徑為0.007″）高效；

3．檢測(cè)器流通池的體積過(guò)大。

4．如何儲(chǔ)存色譜柱

1．防止緩沖溶液和水溶液流動(dòng)相產(chǎn)生微生物要素配置改革，做到流動(dòng)相用多少配多少體系，或在水流動(dòng)相中加200ppm的疊氮鈉以抑制**成長(zhǎng)（一定當(dāng)心其毒性和潛在的爆炸性）；或在流動(dòng)相中加20%的有機(jī)改性劑帶動產業發展，也可抑制微生物生長(zhǎng)責任製，有機(jī)改性劑還有助于流動(dòng)相脫氣十分落實。

2．盡可能將色譜柱貯存于100%有機(jī)溶劑（乙晴*好）中，避免在緩沖溶液中保存規則製定。

3．使用緩沖溶液后的色譜柱製造業，應(yīng)用15～20倍柱體積的不含緩沖劑的同種水—有機(jī)溶劑流動(dòng)相沖洗色譜柱，后換成100%有機(jī)溶劑儲(chǔ)存關規定。

4．避免用純凈水沖洗鍵合致密的C18柱發展基礎。

5．將色譜柱的兩端用堵頭擰好，以免柱床填料干裂建強保護。

如何選擇保護(hù)柱

   怎樣選擇保護(hù)柱同期，但又不能影響分離分析？這是色譜工作者經(jīng)常提出的一個(gè)問(wèn)題使命責任。通常效果，在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔。對(duì)于大部分分析工作者來(lái)說(shuō)合規意識，一只1cm長(zhǎng)的保護(hù)柱密度增加，那么就應(yīng)選擇2cm或3cm長(zhǎng)的保護(hù)柱。保護(hù)柱越長(zhǎng)現場，自然所裝填的色譜填料就越多高端化，則其越能避免污染物進(jìn)入分析色譜柱的機(jī)會(huì)力量。當(dāng)然我有所應，隨著保護(hù)柱的長(zhǎng)度加長(zhǎng)，樣品的保留時(shí)間會(huì)比使用短保護(hù)柱長(zhǎng)深入實施。一般來(lái)說(shuō)至關重要，保護(hù)柱的內(nèi)徑與分析色譜柱的內(nèi)徑相同或相當(dāng)即可。
 

保護(hù)柱的填料裝填方式也很重要效果。目前有薄膜裝填法的保護(hù)柱有所應，使用過(guò)程很簡(jiǎn)單方便，而且可以在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行干裝預期。但是敢於監督，其*大的缺點(diǎn)是不經(jīng)濟(jì)，特別是針對(duì)中國(guó)的具體情況結構，一次性使用相對(duì)費(fèi)用較高重要的作用。另外，薄膜裝填法的保護(hù)柱所裝填的色譜填料有限規模最大，只能提供有限的保護(hù)作用穩中求進；不過(guò)也因?yàn)樗b填的色譜料較少，保護(hù)柱的長(zhǎng)度也較短最深厚的底氣，所以對(duì)分析樣品的保留時(shí)間的影響也很小協同控製。

另一種保護(hù)柱結(jié)構(gòu)其實(shí)質(zhì)是縮短了的色譜分析拄振奮起來，設(shè)計(jì)方式上有直連式、手緊式或整體式利用好。整體式設(shè)計(jì)是由色譜的生產(chǎn)廠商直接安裝在色譜分析柱上的深入各系統，必須與色譜分析柱一同訂貨，可以非常方便地使用尤為突出，但不能夠被修改規定。直連式結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)可在任何時(shí)候有色譜工作者來(lái)安裝連接，可以與任何品牌的色譜分析柱連接使用空間載體，而且還可以根據(jù)樣品的相關(guān)情況選擇不同的保護(hù)柱長(zhǎng)度高質量。手上緊即可。另外從保護(hù)柱結(jié)構(gòu)又分為是否可以更換保護(hù)柱柱芯重要組成部分×鞒?？梢越档捅Ｗo(hù)柱的使用成本。

大多數(shù)人是根據(jù)色譜分析柱的填料選擇保護(hù)柱的填料勃勃生機，正常情況下可以選擇與分析色譜柱一樣的色譜填料助力各業。但是，根據(jù)實(shí)際的分析工作提供有力支撐，也可不必與分析色譜柱的填料完全相匹配應用。

對(duì)于選擇保護(hù)柱的原則是：在滿足分析分離要求的前提條件下，盡可能的選擇較短的保護(hù)柱結(jié)構(gòu)品率，盡可能選擇對(duì)分離樣品小一些保留性的填料相貫通。

如何解決色譜柱使用過(guò)程中出現(xiàn)的問(wèn)題及保護(hù)色譜柱